产品目录

CAS号：
分子式：
分子量：
纯度：
保存：2～8℃

储存条件：制胶液和上样液短期4℃保存，长期-20℃保存，有效期1年。
产品组成：
注意：过硫酸铵(APS)为固体粉末，使用前配制成10% APS溶液(0.1g APS加1mL双蒸水)。APS溶液最好现配现用，通常4℃可保存一周，-20℃能保存半年。
操作步骤：
一、胶制备尿素-PAGE胶
1．计算灌胶所需制胶液体积。
2.按照每100mL的6%尿素-PAGE制胶液中加入10%的APS溶液0.5mL，TEMED 0.1mL(冬季可以将APS和TEMED各增加50%～100%，以加速凝胶)的比例配置PAGE胶灌胶液。
3．将配置好的灌胶液倒入胶板，在胶的液面距离达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
4.室温聚合30～60分钟(低温抑制聚合反应，故最好室温)。
5.待胶凝固后拔出梳子，用0.5×TBE液冲洗加样孔。
三、样品处理
对一般样品、测序样品、微卫星DNA、AFLP样品、DDRT样品、RPA样品：将样品跟上样液1:1混合，95℃ 3分钟变性，然后放冰上待用；对TGGE样品：可以直接上样。
四、电泳
1．将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽中加入足够0.5×TEB电泳液。
2．预电泳5～30分钟后，将冰上放置的样品上样。
3.连接电源线，打开电源开关。根据胶的大小选择功率(固定功率可以固定产热，这样不容易发生过热而使胶板破裂的现象。如果固定电流或电压，产热都将随电泳时间而变化，不好控制)。对小胶一般用5-6W固定功率，大胶用15-25W固定功率。
4.终止电泳，取出凝胶进行后续的处理(如银染)。注意：如果银染，必须延长固定时间以便洗出尿素，否则残留尿素会干扰后面的银染。
注意事项：
1.APS溶液不稳定，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换10% APS。
2.PAGE凝胶的凝聚速度与温度以及APS、TEMED的用量密切相关；可通过改变APS及TEMED的用量，控制PAGE凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作。
3.在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。
4.丙烯酰胺具有神经毒性，操作时请穿戴实验服和一次性手套。
附表：(单位：尿素g，其余为mL)
6%的尿素-PAGE胶成分：
1L包含(420g尿素，40% 19:1的丙烯酰胺150mL，10×TBE 50mL，补水到1000mL)
相关搜索：6%尿素-PAGE制胶液，6% Urea-PAGE Gel solution